食用植物油造假的物证提取方法——高效液相色谱
食用植物油是民众日常生活中的必需品，在市场中具有很高需求量。然而一些不法商贩为追逐更高的经济利益，用掺假植物油以次充好进行销售，这些不法行为严重影响了消费者的合法权益和身体健康，破坏了市场秩序。在打击这些违法行为的过程中，涉假油脂物证的检验结果是重要的证据。本文在对植物油脂种属特征的研究基础上[1-3]，采用高效液相色谱−蒸发光散射法对甘油三酯标准品和常见食用植物油的特征谱图进行了系统分析，通过比较不同植物油的特征性甘油三酯谱图对其加以区分，为揭露、打击植物油脂造假违法行为提供依据。
1 材料和方法
1.1 食用油样品
市售食用植物油样品11份（见表1）。
表1 食用植物油样品一览表
Table 1 Vegetable oils to test
1.2 样品溶液及甘油三酯标准品溶液的配制
标准甘油三酯：月桂酸甘油酯（LaLaLa）、1,2-亚油酸-3-棕榈酸甘油酯(LLP)、1,2亚油酸-3-油酸甘油酯(LLO)、1,2-豆蔻酸-3-棕榈酸甘油酯(MMP)、油酸甘油三酯（OOO）、1,2-油酸-3-棕榈酸甘油酯(OOP)、1,3-油酸-2-棕榈酸甘油酯(OPO)、1,2-油酸-3-硬脂酸甘油酯(OOSt)、1,3-油酸-2-硬脂酸甘油酯(OStO)、1-棕榈酸-2油酸-3-亚油酸甘油酯(POL)、1,2-棕榈酸-3-油酸甘油酯（PPO）、1,3-棕榈酸-2-油酸甘油酯（POP）、1-棕榈酸-2-亚油酸-3-硬脂酸甘油酯(PLSt)、1-硬脂酸-2-油酸-3-硬脂酸甘油酯(POSt)、1,2-棕榈酸-3-硬脂酸甘油酯（PPSt）、1-硬脂酸-2-棕榈酸-3-油酸甘油酯(StPO)、1,2-硬脂酸-3-油酸甘油酯（StStO）、1,3-硬脂酸-2-棕榈酸甘油酯(StPSt)。分别称取18种标准品各2.0 mg置于10.0 mL容量瓶中，用丙酮溶解、定容，配制成甘油三酯标准溶液，检测时分别取等量混合制成混合标准样品溶液，待测。分别取11种食用油样品1微升溶解于1mL丙酮中，配成样品溶液，待测。
1.3 仪器及条件
美国Agilent 1100series高效液相色谱仪；Waters C18色谱柱（150 mm×3.9 mm，4 μm）；柱温：35 ℃；流动相：二氯甲烷-乙腈-冰乙酸（体积比30꞉70꞉0.2）；流速：1.0mL/min；蒸发光散射检测器（Model 1400ELSD）；漂移管温度：70 ℃；雾化管温度：30 ℃；光学池温度：80 ℃；排气管温度：60 ℃；GAS：45~55 P；柱温箱温度：35 ℃[4-7]。
2 结果与讨论
2.1 甘油三酯混合标准溶液的分析
采用乔杰[8]的方法分析标准品，结果如图1。
2.2 各种植物油样品的HPLC - ELSD特征谱图分析
本文实验中选取了11种市售植物油，经实验验证不同种属的植物油甘油三酯的特征色谱峰有较大差异。在大豆油中，LLO、LLP、MMP、POL以及两种未知的甘油三酯的色谱特征比较明显，而OPO/ OOP、PLSt、PPO/POP的色谱峰响应值均较低（见图2）。
两种菜籽油的色谱特征基本一致，均含有LLO、LLP、MMP、POL、OOO、OPO/OOP以及两种未知的甘油三酯；从甘油三酯的相对含量看，两种菜籽油中的MMP和OOO的相对含量均较高。但二者的特征谱图仍存在细微的差异，芥花籽油中除了两者均含有的LLO、LLP两色谱峰外还含有与二者紧邻的一未知色谱峰（见图3、图4）。
图1 18种甘油三酯标准物质混合溶液的HPLC-ELSD谱图
Fig.1 HPLC - ELSD spectra of the mixture of 18-kind triglyceride standards
图2 大豆油HPLC-ELSD分析谱图
Fig.2 HPLC - ELSD spectra of the soybean oil
图3 菜籽油HPLC-ELSD分析谱图
Fig.3 HPLC - ELSD spectra of the rapeseed oil
图4 芥花籽油 HPLC-ELSD分析谱图
Fig.4 HPLC - ELSD spectra of the canola oil
玉米油中甘油三酯相对含量由大到小的顺序依次为：LLO、未知甘三酯峰、LLP、MMP、POL、OOO、OPO/OOP（见图5）。
在花生油中，LLO、MMP、OOO、POL的相对含量较高。另外，LLP和OPO/OOP的响应值也较高，其它甘油三酯的色谱峰响应值较低，色谱峰不明显（见图6）。
在葵花籽油中，LLO、LLP、MMP、POL、OPO/OOP的色谱峰响应值较高（见图7）。
橄榄油中OOO相对含量最高，其次是OPO/ OOP，然后是MMP、POL。另外，LLO、LLP、OOSt/OStO、PPO/POP的色谱响应值也比较明显（见图8）。
芝麻油中有一未知甘三酯、LLO、LLP、MMP、POL、OOO、OPO/OOP、PLSt、OOSt/OStO等甘油三酯的色谱峰（见图9）。
油茶籽油中甘三酯种类较少，且只有OOO色谱特征比较明显（见图10）。
胡麻油和亚麻籽油的特征谱图非常相像，按照出峰时间先后都含有：一个含量最高的未知峰，LaLaLa，紧接着是四个未知峰，然后是LLO、LLP、MMP、POL（见图11、图12）。
图5 玉米油 HPLC-ELSD分析谱图
Fig.5 HPLC - ELSD spectra of the corn oil
图6 花生油HPLC-ELSD分析谱图
Fig.6 HPLC - ELSD spectra of the peanut oil
图7 葵花籽油HPLC-ELSD分析谱图
Fig.7 HPLC - ELSD spectra of the sunflower oil
图8 橄榄油HPLC-ELSD分析谱图
Fig.8 HPLC - ELSD spectra of the olive oil
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